Phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase thời gian thực
From Wikipedia, the free encyclopedia
Phản ứng chuỗi polymerase thời gian thực (hay PCR thời gian thực, hoặc khi sử dụng để định lượng có thể gọi là qPCR) là một kỹ thuật thí nghiệm trong lĩnh vực sinh học phân tử dựa trên dựa trên phản ứng chuỗi polymerase (PCR). Phương pháp này giám sát quá trình khuếch đại một đoạn DNA cụ thể trong suốt quá trình PCR (tức là thời gian thực), không phải ở cuối quá trình như trong PCR thông thường. PCR thời gian thực có thể được sử dụng định lượng (PCR thời gian thực định lượng) và bán định lượng (nghĩa là trên/dưới một lượng phân tử DNA nhất định) (PCR thời gian thực bán định lượng).
Hai phương pháp phổ biến để phát hiện các sản phẩm PCR trong PCR thời gian thực là (1) thuốc nhuộm huỳnh quang không đặc hiệu xen kẽ với bất kỳ DNA sợi kép và (2) đầu dò DNA đặc hiệu gồm oligonucleotide được dán nhãn bằng máy phóng huỳnh quang, cho phép phát hiện chỉ sau khi lai acid nucleic của đầu dò với trình tự bổ sung của nó.
Hướng dẫn "The Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments" (MIQE) đề xuất rằng viết tắt "qPCR" được sử dụng để chỉ "quantitative real-time PCR," và "RT-qPCR" được sử dụng để chỉ "reverse transcription–qPCR."[1] Thuật ngữ "RT-PCR" thường được sử dụng để chỉ "phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase sao chép ngược" và không phải là "real-time PCR." Tuy nhiên, không tất cả các tác giả đều tuân thủ quy ước này.[2]