Gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu
From Wikipedia, the free encyclopedia
Gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (gerçek zamanlı PCR), polimeraz zincir reaksiyonuna (PCR) dayanan bir moleküler biyoloji laboratuvar tekniğidir. Hedeflenen bir DNA molekülünün amplifikasyonunu geleneksel PCR'da olduğu gibi sonunda değil, PCR sırasında (yani gerçek zamanlı olarak) izler. Real-time PCR, kantitatif (kantitatif real-time PCR) ve yarı-kantitatif (yani, belirli bir miktarda DNA molekülünün üstünde/altında) olarak kullanılabilir.
Gerçek zamanlı PCR'da PCR ürünlerinin tespiti için iki yaygın yöntem kullanılmaktadır: (1) herhangi bir çift sarmallı DNA ile araya giren spesifik olmayan flüoresan boyalar ve (2) bir flüoresan raportör ile etiketlenmiş oligonükleotitlerden oluşan diziye özgü DNA problarıdır. İkinci metot, yalnızca probun tamamlayıcı dizisi ile hibridizasyonundan sonra algılamaya izin verir.
Kantitatif Gerçek Zamanlı PCR Deneylerinin Yayınlanması için Asgari Bilgi (MIQE) kılavuzları, kantitatif gerçek zamanlı PCR için qPCR kısaltmasının ve ters transkripsiyon-qPCR için RT-qPCR'nin kullanılmasını önermektedir.[1] "RT-PCR" kısaltması, genel olarak ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonunu belirtir, gerçek zamanlı PCR'yi değil. Ancak tüm yazarlar bu sözleşmeye uymaz.[2]